Avidin-peroxidáza: Porovnání verzí
Smazaný obsah Přidaný obsah
m napřímení odkazu |
m napřímení 2 odkazů |
||
Řádek 4:
== Použití ==
[[Soubor:HeLa cell endocytic pathway labeled for EGFR and transferrin.jpg|thumb|Mikrofotografie lidských [[HeLa]] buněk; tmavé skvrny znázorňují místa, kde se vyskytuje v buňce protein [[transferin]], a to právě pomocí vazby křenové peroxidázy na bílkovinu transferin]]
Avidin-peroxidáza se velmi často používá v laboratoři k vizualizaci různých biochemických interakcí (protein-proteinových, protein-[[sacharid]]ových, …), u nichž jeden z účastníků této interakce je modifikován [[vitamín H|biotin]]em. Avidin je schopen se specificky a velmi silně vázat na biotin a přes tzv. avidin-biotinový můstek je tedy schopen připojit peroxidasu k interagujícím látkám.
Peroxidáza pak po dodání zdroje [[Peroxidy|peroxidu]] ([[peroxid vodíku|H<sub>2</sub>O<sub>2</sub>]], [[peroxoboritan sodný|NaBO<sub>3</sub>]], …) a vhodného [[substrát (chemie)|substrátu]] (jenž oxiduje a změní jeho vlastnosti –[[barva]], [[rozpustnost]]) vizualizuje tuto interakci. Příkladem vhodných substrátů můžou být [[4-chloro-1-naftol]] - po oxidaci dochází ke vzniku nerozpustné fialové látky – a [[ABTS]] (2,2'-azino-bis(3-ethylbenzthiazolin-6-sulfonát), který tvoří stabilní, zeleně zbarvené rozpustné [[radikál]]y.
Řádek 24:
|křen selský (''Armoracia rusticana'')
|-
| [[Molární hmotnost|molekulová hmotnost]]
|~44 000<ref>Welinder, K.G., Eur. J. Biochem., 96, 483–502 (1978)</ref>
|-
Řádek 50:
| [[vaječný bílek]]
|-
| [[Molární hmotnost|molekulová hmotnost]]
| homo[[tetramer]], celková Mr = 66-69 000
|-
Řádek 61:
|-
|}
Podobně jako avidin se používá i [[streptavidin]] - [[Bílkovina|protein]] o podobných vlastnostech jako [[avidin]] (silná a specifická vazba [[vitamín H|biotin]]u) izolovaný z ''Streptomyces avidinii''. Na rozdíl od avidinu není streptavidin vůbec [[glykoprotein|glykosylován]].
=== Používané substráty avidin peroxidázy ===
| |||