Verze z 6. 3. 2010, 18:42 editovat Luckas-bot (diskuse \| příspěvky) 248 204 editací m robot přidal: ru:Пероксидаза хрена ← Přejít na předchozí porovnání		Verze z 20. 10. 2010, 20:43 editovat zrušit editaci JAnDbot (diskuse \| příspěvky) Roboti 1 711 609 editací m Robot opravil přesměrování na Peroxid - Změněn(y) odkaz(y) na Peroxidy; kosmetické úpravy Přejít na další porovnání →
Řádek 1: [[~~File~~Soubor:GlutPeroxidase-1GP1.png\|thumb\|Peroxidáza je enzym, tzn. patří mezi proteiny; zde znázorněna [[glutathion peroxidáza]]]] '''Avidin-peroxidáza''' (též '''avidin-peroxidasa''') je modifikovaná [[peroxidáza]] (nejčastěji získávaná z [[křen selský\|křenu selského]], ''Armoracia rusticana''), na kterou je kovalentně připojen protein [[avidin]] (z [[vaječný bílek\|vaječného bílku]]). == Použití == [[~~File~~Soubor:HeLa cell endocytic pathway labeled for EGFR and transferrin.jpg\|thumb\|Mikrofotografie lidských [[HeLa]] buněk; tmavé skvrny znázorňují místa, kde se vyskytuje v buňce protein [[transferin]], a to právě pomocí vazby křenové peroxidázy na bílkovinu transferin]] Avidin-peroxidáza se velmi často používá v laboratoři k vizualizaci různých biochemických interakcí (protein-proteinových, protein-[[sacharid]]ových, …), u nichž jeden z účastníků této interakce je modifikován [[biotin]]em. Avidin je schopen se specificky a velmi silně vázat na biotin a přes tzv. avidin-biotinový můstek je tedy schopen připojit peroxidasu k interagujícím látkám. Peroxidáza pak po dodání zdroje [[~~peroxid~~Peroxidy\|peroxidu]]u ([[peroxid vodíku\|H<sub>2</sub>O<sub>2</sub>]], [[peroxoboritan sodný\|NaBO<sub>3</sub>]], …) a vhodného substrátu (jenž oxiduje a změní jeho vlastnosti –[[barva]], [[rozpustnost]]) vizualizuje tuto interakci. Příkladem vhodných substrátů můžou být [[4-chloro-1-naftol]] - po oxidaci dochází ke vzniku nerozpustné fialové látky – a [[ABTS]] (2,2'-azino-bis(3-ethylbenzthiazolin-6-sulfonát), který tvoří stabilní, zeleně zbarvené rozpustné [[radikál]]y. [[~~Image~~Soubor:ABTS.png\|thumb\|vzorec ABTS]] Avidin peroxidasy se často využívá při metodě [[ELISA]] a [[enzyme-linked binding assay\|ELBA]] metodě a při [[western blot]]u. Podobně jako avidin-peroxidasa se však také často využívá kyselá nebo alkalická [[avidin-fosfatáza]]. Řádek 13: == Stavební částice == === Křenová peroxidáza === {\| class=wikitable Řádek 41: \|} === Avidin === [[~~image~~Soubor:Biotin2.svg‎\|thumb\|biotin]] {\| class=wikitable Řádek 63: Podobně jako avidin se používá i [[streptavidin]] - [[protein]] o podobných vlastnostech jako [[avidin]] (silná a specifická vazba [[biotin]]u) izolovaný z ''Streptomyces avidinii''. Narozdíl od avidinu není streptavidin vůbec [[glykoprotein\|glykosylován]]. === Používané substráty avidin peroxidázy === {\| class="wikitable" Řádek 100: \|} == Příprava avidin-peroxidázy == Křenová peroxidáza je [[kovalentní vazba\|kovalentně]] připojena na avidin pomocí [[bismaleimid]]u (dimaleimidu) v poměru přibližně 2:1 (HRP:avidin)<ref>O'Sullivan MJ, et al, FEBS letters, 35, 311-313 (1978).</ref> == Odkazy == === Reference === <references/> === Související články === * [[ELISA]] * [[avidin]] * [[peroxidázy]] * [[mikrotitrační destička]] [[Kategorie:Oxidoreduktázy]]

Avidin-peroxidáza: Porovnání verzí