Médium MEM

syntetické médium používané ke kultivaci buněčných kultur

Médium MEM (Minimum Essential Medium) je syntetické médium používané ke kultivaci buněčných kultur. Bylo vyvinuto Harry Eaglem v roce 1959[1]. Lze ho využít ke kultivaci širokého spektra savčích buněk včetně HeLa, BHK-21, HEK-293, HEP-2, HT-1080, MCF-7, fibroblastů a primárních krysích astrocytů.[2]. MEM je roztok takzvaných Earlových solí pojmenovaných po W. R. Earlovi, který definoval jejich složení [3], doplněný o esenciální aminokyseliny, glukosu a vitaminy. Jelikož MEM médium neobsahuje proteiny, lipidy ani růstové faktory, je často nutné doplnit MEM o fetální bovinní sérum.

Eaglovo MEM (Eagle's minimum essential medium) (vlevo)

Předchůdcem MEM bylo médium BME (Basal Medium Eagle) taktéž vyvinuto H. Eaglem v letech 1955-1957. Hlavním rozdílem bylo menší množství aminokyselin.[4]

V dnešní době existuje již několik modifikovaných MEM médií.

Složení

editovat

Následující tabulka obsahuje jednotlivé složky MEM a jejich koncentrace.[1]

Složka Koncentrace [mg/l]
L-Arginin 105
L-Cystein 24
L-Glutamin 292
L-Histidin 31
L-Isoleucin 52
L-Lysin 58
L-Methionin 15
L-Fenylalanin 32
L-Threonin 48
L-Tryptofan 10
L-Tyrosin 36
L-Valin 46
Glukosa 1000
NaCl 6800
KCl 400
CaCl2 200
MgCl2·6H2O 200
NaH2PO4·2H2O 150
Cholin 1
Kyselina listová 1
Inositol 2
Nikotinamid 1
Pantotenát 1
Pyridoxal 1
Riboflavin 0,1
Thiamin 1

Modifikovaná MEM media

editovat

DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium): Médium obsahující čtyřnásobek koncentrace vitaminů a aminokyselin oproti MEM. Poprvé použito R. Dulbeccem při studiu polyomavirů.[5]

MEM α: Oproti MEM navíc obsahuje i neesenciální aminokyseliny, kyselinu L-askorbovou, biotin, vitamin B12, lipoovou kyselinu, pyruvát sodný, nukleosidy a deoxynukleosidy.[6]

EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium): Mnozí prodejci uvádějí na trh i médium pod zkratkou EMEM, jedná se o MEM s přídavkem neesenciálních aminokyselin.[7]

Reference

editovat
  1. a b EAGLE, Harry. Amino Acid Metabolism in Mammalian Cell Cultures. Science. 1959-08-21, roč. 130, čís. 3373, s. 432–437. Dostupné online [cit. 2023-03-09]. ISSN 0036-8075. DOI 10.1126/science.130.3373.432. (anglicky) 
  2. https://www.thermofisher.com/cz/en/home/life-science/cell-culture/mammalian-cell-culture/cell-culture-media/mem.html
  3. EARLE, Wilton R.; SCHILLING, Edward L., et al. Production of Malignancy in Vitro. IV. The Mouse Fibroblast Cultures and Changes Seen in the Living Cells. JNCI: Journal of the National Cancer Institute. 1943-10. Dostupné online [cit. 2023-03-09]. ISSN 1460-2105. DOI 10.1093/jnci/4.2.165. (anglicky) 
  4. EAGLE, Harry. Nutrition Needs of Mammalian Cells in Tissue Culture. Science. 1955-09-16, roč. 122, čís. 3168, s. 501–504. Dostupné online [cit. 2023-03-12]. ISSN 0036-8075. DOI 10.1126/science.122.3168.501. (anglicky) 
  5. DULBECCO, R.; FREEMAN, G. Plaque production by the polyoma virus. Virology. 1959-07, roč. 8, čís. 3, s. 396–397. Dostupné online [cit. 2023-03-12]. DOI 10.1016/0042-6822(59)90043-1. (anglicky) 
  6. STANNERS, C. P.; ELICEIRI, G. L.; GREEN, H. Two Types of Ribosome in Mouse–Hamster Hybrid Cells. Nature New Biology. 1971-03, roč. 230, čís. 10, s. 52–54. Dostupné online [cit. 2023-03-12]. ISSN 2058-1092. DOI 10.1038/newbio230052a0. (anglicky) 
  7. Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) - 30-2003 | ATCC. www.atcc.org [online]. [cit. 2023-04-27]. Dostupné online.