Escherichia coli: Porovnání verzí

Smazaný obsah Přidaný obsah
upravy formatu, typografie, ...
Řádek 18:
}}
 
'''''Escherichia coli''''' (původním názvem ''[['''Bacterium coli]]''''') je [[gramnegativní]] [[fakultativně]] [[anaerobní]] [[spory]] netvořící tyčinkovitá bakterie pohybující se pomocí [[bičík|bičíků]]. Spadá pod čeleď ''[[Enterobacteriaceae]]'', jež také zahrnuje množství [[patogen]]ních rodů mikroorganismů. ''E. coli'' patří ke střevní mikrofloře teplokrevných živočichů, včetně člověka. Z tohoto důvodu je její přítomnost v pitné vodě indikátorem fekálního znečištění. Člověku je jako součást přirozené mikroflory prospěšná, jelikož produkuje řadu látek, které brání rozšíření patogenních bakterií
([[koliciny]]) a podílí se i na tvorbě některých [[vitamin|vitamínů ]](např. [[vitamin K|vitamín K]]).
Byla objevena německo-rakouským pediatrem a bakteriologem [[Theodor Escherich|Theodorem Escherichem]] v roce 1885<ref>[http://www.fda.gov/Food/ScienceResearch/LaboratoryMethods/BacteriologicalAnalyticalManualBAM/ucm064948.htm#fn14 Koliformní bakterie a E. coli (anglicky)]</ref>.<br />
 
''E. coli'' patří k nejlépe prostudovaným mikroorganismům, jelikož je modelovým organismem pro genové a klinické studie. [[Joshua Lederberg]] jako první r. 1947 pozoroval a popsal na bakterii ''E. coli'' výměnu genetického materiálu tzv. [[konjugace|konjugaci]]<ref>[http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1209583/pdf/720.pdf Objev procesu konjugace u E. coli (anglicky)]</ref>.
 
==Popis ''E. coli''==
===Morfologická charakteristika===
''E. coli'' je [[sporulace|nesporotvorná]] [[tyčinky (bakterie)|tyčinka]], jež se pohybuje pomocí bičíku. Bakterie dosahuje délky 2–3 μm a šířky 0,6 μm. Některé druhy mohou tvořit slizovité obaly, jež jsou složeny z polysacharidů. Na svém povrchu nese dva typy [[fimbrie|fimbrií]]. První typ fimbrií se skládá z kyselého hydrofobního proteinu tzv. [[fimbrin|fimbrinu]]u. Umožňuje bakterii přichytit se na epitel hostitele a následně jej kolonizovat. Kolonizace je usnadněna vysokým počtem fimbrií prvního typu na buňku (100-1000 ks/buňka). Tyto fimbrie jsou vysoce antigenní, jelikož obsahují tzv. '''[[F antigeny'''antigen]]y. Druhým typem fimbrií jsou tzv. [[pilus|sex pili]], jež hrají důležitou úlohu při konjugaci.
 
Druhým typem fimbrií jsou tzv. '''[[sex pili]]''', jež hrají důležitou úlohu při konjugaci. <br />
Bakterie se může pohybovat pomocí bičíků (flagella)[[bičík]]ů. Ty jsou složeny z tzv. [[flagelin]]u (na [[lysin]] bohatý protein). Bičíky jsou stejně jako fimbrie vysoce antigenní, a to díky tzv. '''H antigenům'''.<br />Na povrchu bakterie se při stresových podmínkách dále mohou tvořit polysacharidové [[kapsule]], jež obsahují tzv. K a M antigeny.
 
Na povrchu bakterie se při stresových podmínkách mohou tvořit polysacharidové [[kapsule]], jež obsahují tzv. '''K''' a '''M antigeny'''.
[[Vnější membrána]] je pokryta [[lipopolysacharid]]em a skládá se z [[lipidová dvojvrstva|lipidové dvojvrstvy]], kde je ukotveno množství membránových proteinů. Mezi proteiny, které tvoří póry, patří [[porin|poriny]] [[Omp C]], [[Omp F]] a [[Pho E]]. Poriny slouží jako vstupní/ a výstupní kanály pro buněčné metabolity a pro příjem vitaminů z okolí. <br />
 
Prostor mezi vnější membránou a buněčnou stěnou se nazývá [[periplazmatický prostor|periplazmatický]]. Vyskytují se zde např. proteiny vázající aminokyseliny či cukry, enzymy degradující antibiotika ([[beta-laktamáza|beta-laktamasy]]).<br />
 
[[Buněčná stěna]] ''E. coli'' (jakožto zástupce gramnegativních bakterií) se skládá z tenké vrstvy [[peptidoglykan]]u, jež jenž je zodpovědný za rigidní tvar buňky. Pod vrstvou peptidoglykanu se nalézá [[cytoplazmatická membrána]]. Ta se skládá především z proteinů (70%), [[lipopolysacharid]]ů a [[fosfolipid]]ů. Je zdev ní lokalizováno mnoho biochemických pochodů, např. [[dýchací řetězec]] a [[Adenosintrifosfátoxidativní fosforylace|syntéza ATP]].
 
[[Cytoplazma]] bakteriální buňky je viskózní vodný roztok, jež obsahuje rozpuštěné anorganické a organické látky. Nachází se zde množství [[ribosom|ribosomůribozom]]ů (cca 40% hmotnosti celé buňky), díky nimž je [[proteosyntéza]] a dělení bakteriálních buněk velice rychlé. Při optimálních podmínkách (37°C, dostatek živin) je doba generace zhruba 20 min. Bakteriální ribosomyribozomy jsou menší než eukaryotní. Mají [[sedimentační konstanta|sedimentační konstantu]] 70S. <br />
[[Vnější membrána]] je pokryta [[lipopolysacharid]]em a skládá se z [[lipidová dvojvrstva|lipidové dvojvrstvy]], kde je ukotveno množství membránových proteinů. Mezi proteiny, které tvoří póry, patří [[porin|poriny]] [[Omp C]], [[Omp F]] a [[Pho E]]. Poriny slouží jako vstupní/výstupní kanály pro buněčné metabolity a pro příjem vitaminů z okolí. <br />
Prostor mezi vnější membránou a buněčnou stěnou se nazývá [[periplazmatický prostor|periplazmatický]]. Vyskytují se zde např. proteiny vázající aminokyseliny či cukry, enzymy degradující antibiotika (beta-laktamasy).<br />
[[Buněčná stěna]] ''E. coli'' jakožto zástupce gramnegativních bakterií se skládá z tenké [[peptidoglykan]]u, jež je zodpovědný za rigidní tvar buňky. Pod vrstvou peptidoglykanu se nalézá [[cytoplazmatická membrána]]. Ta se skládá především z proteinů (70%), [[lipopolysacharid]]ů a [[fosfolipid]]ů. Je zde lokalizováno mnoho biochemických pochodů např. [[dýchací řetězec]] a [[Adenosintrifosfát|syntéza ATP]].
 
Dále se zde nalézá molekula bakteriální [[DNA]], ve které je uložena veškerá dědičná informace bakterie. Velikost DNA u ''E. coli'' K-12 je zhruba 4700 kbp, coža odpovídákóduje zhrubacca 4400 proteinůmproteinů.<ref name=miami/>. Cytoplazma bakterií na rozdíl od cytoplazmy eukaryot neobsahuje membránové organely (kromě ribosomů). a netvoří se zde vakuoly.
[[Cytoplazma]] bakteriální buňky je viskózní vodný roztok, jež obsahuje rozpuštěné anorganické a organické látky. Nachází se zde množství [[ribosom|ribosomů]] (cca 40% hmotnosti celé buňky), díky nimž je [[proteosyntéza]] a dělení bakteriálních buněk velice rychlé. Při optimálních podmínkách (37°C, dostatek živin) je doba generace zhruba 20 min. Bakteriální ribosomy jsou menší než eukaryotní. Mají sedimentační konstantu 70S. <br />
Dále se zde nalézá molekula bakteriální [[DNA]], ve které je uložena veškerá dědičná informace bakterie. Velikost DNA u ''E. coli'' K-12 je zhruba 4700 kbp, což odpovídá zhruba 4400 proteinům<ref name=miami/>. Cytoplazma bakterií na rozdíl od cytoplazmy eukaryot neobsahuje organely (kromě ribosomů). a netvoří se zde vakuoly.
 
===Fyziologická charakteristika===
''E. coli'' je [[fakultativní]] [[anaerobní|anaerob]], tj. využívá respirační i kvasný [[metabolismus]] ([[fermentace]]) pro přísun energie. ''E. coli'' jako [[chemoheterotrofie|chemoheterotrof]] je schopná využívat množství cukrů i aminokyselin jako zdroj uhlíku, nejrychleji však roste na [[Glukóza|glukose]]. Za anaerobních podmínek ''E. coli'' utilizuje glukosu za vzniku [[laktát|laktátu]], [[sukcinát|sukcinátu]], [[acetát|acetátu]] i [[ethanol|ethanolu]]. Za aerobních podmínek je glukosa využita efektivněji a konečnými produkty je především oxid uhličitý. ''E. coli'' produkuje [[indol]], avšak neroste na [[citrát|citrátu]] a neprodukuje [[sirovodík]]. Je [[katalasakataláza]] -pozitivní, [[oxidasaoxidáza]] -negativní. Těchto vlastností se využívá při její identifikaci pomocí tzv. [[Enterotest|Enterotestu]]u <ref name=silhankova> Šilhánková L., Mikrobiologie pro potravináře a biotechnology, ACADEMIA, 2002. ISBN 80-200-1024-6.</ref>. ''E. coli'' je schopná růst za teploty 8°C-48°C, avšak optimální teplota je 37°C. Rozsah pH pro růst je pH6-pH8<ref name=miami/>.
 
===Antigenní charakteristika===
''E. coli'' můžeme taxonomicky dělit dle antigenních struktur na [[sérotyp|sérotypy]]. Mezi hlavní struktury patří somatické '''O antigeny''' ([[lipopolysacharid]]), jichž je 170 typů, a kapsulární '''K antigeny''' (80 typů), dalšími strukturami jsou např. '''H antigeny''' (flagelární proteiny) a '''F antigeny''' (bílkoviny fimbrií)<ref name=miami>[http://www.sciencedirect.com/science_ob=MiamiImageURL&_cid=277740&_user=640812&_pii=B9780123739445000596&_check=y&_origin=na&_coverDate=31-Dec-2009&view=c&wchp=dGLbVlB-zSkzk&md5=05688636a54fcc90df753d5da850ee9a/3-s2.0-B9780123739445000596-main.pdf Escherichia coli (anglicky)]</ref>.<br />
 
==Patogenita ''E. coli''==
''E. coli'' je jednou z nejčastěji se vyskytujících bakterií v klinických vzorcích. Její přítomnost je u člověka fyziologická pouze ve střevech jako součást [[střevní mikroflóra|střevní mikroflory]]. Avšak patologicky se může vyskytovat i v krevních vzorcích, a být tak původcem [[bakteremiebakterémie]]. Často způsobuje [[nosokomiální infekce]] tj. infekce získané v nemocnicích. Bakteriální infekce se léčí podáváním [[antibiotika|antibiotik]]. V dnešní době však nalézáme stále větší množství kmenů bakterií, které jsou k podávaným antibiotikům [[antibiotická rezistence|rezistentní]].
 
[[patogen|Patogenní]] kmeny způsobují dva typy onemocnění. Prvním je [[extraintestiální]] onemocnění, kdy jsou napadeny především močové cesty, dochází k infekci ran a jejich hnisání. Pokud se bakterie dostává do [[trávicí soustava|intestinálního traktu]] člověka, vyvolává infekce provázené průjmy. Extraintestiální formy onemocnění jsou vyvolávány kmeny , jež mají polysacharidový kapsulární '''K antigen''', příp '''P fimbrie''', jimiž [[adheze|adherují]] na povrch sliznic. Pokud se bakterie ''E. coli'' dostane do zažívacího traktu, mluví se o ní jako o enteropatogenním kmenu'' E. coli''. Ty se mohou dále dělit:
Řádek 83 ⟶ 86:
Mechanismus účinku beta-laktamových antibiotik ([[penicilin]], [[ampicilin]], [[cefalosporiny]]) je založen na skutečnosti, že beta-laktamový kruh antibiotika naruší syntézu buněčné stěny bakterie, a ta, jelikož není chráněná, zahyne.
 
''E. coli'' může produkovat enzym tzv. [[beta-laktamasalaktamáza|beta-laktamasulaktamázu]], jež hydrolyzuje beta-laktamový kruh antibiotika , a tím se stává imunní k působení tohoto antibiotika. Geny pro tuto rezistenci bývají uloženy na [[plasmid|plasmidu]], a proto je genetická informace velice snadno přístupná k předávání jiným bakteriím (i mezidruhově). Nevýhodou informace uložené na plasmidu, je skutečnost, že nemusí při [[dělení buňky]] dojít k jejímu předání oběma dceřinným buňkám. Rezistentní by byla pouze jedna z nově vzniklých buněk, druhá by rezistenci nenesla.
 
Dnes je známo, že v České republice je ''E. coli'' cca ze 60% případů rezistentní k podávání aminopenicilinů[[aminopenicilin]]ů a z 15% k cefalosporinům[[cefalosporin]]ům<ref name=rezistence>[http://http://ecdc.europa.eu/en/publications/Publications/1011_SUR_annual_EARS_Net_2009.pdf. E. coli a resistence k antibiotikům (anglicky)]</ref>.
 
===Rezistence k fluorochinolonům===
Fluorochinolony[[Fluorochinolon]]y jsou antibiotika, jež inhibují [[replikace|replikaci]] bakteriální [[DNA]]. Pokud si bakterie na ně vyvine rezistenci, může se jednat o dva různé mechanismy. Nejčastějším je tzv. [[eflux|efluxu]] tj. po tom, co se [[antibiotikum]] dostane do bakteriální buňky, je pomocí membránových pump tzv. porinů vyčerpáno zpět do mimobakteriálníhomimo prostorubuňku.
 
Druhým způsobem, jak se bakterie brání působení fluorochinolonů je pozměnění ([[methylace]], [[adenylace]]) jejich cílových struktur, tedy enzymů, jež jsou zodpovědné za replikaci bakteriální DNA. Tyto enzymy se nazývají [[DNA gyrasagyráza]] a [[Topoizomeráza|topoisomerasatopoisomeráza IV]]. V České republice se rezistence kmenů ''E. coli'' k fluorochinolonům pohybuje okolo 25% případů, což je zhruba evropský průměr.<ref name=rezistence></ref>.
 
===Rezistence k aminoglykosidům===
Aminoglykosidy jsou antibiotika, která blokují proces [[translace]] tj. přepis genetické informace z řeči nukleotidů do řeči aminokyselin. Enzymy, kde translace probíhá se nazývají [[ribosomribozom]]y. Rezistence k těmto antibiotikům spočívá v modifikaci ribosomůribozomů (methylace, adenylace) tak, že se stanou pro aminoglikosidová[[aminoglykosidová antibiotika]] biologicky inertní. <br />
 
V České republice se výskyt ''E. coli'' rezistentní k aminoglykosidům pohybuje okolo 10&nbsp;% případů, což je v rámci Evropy stále průměrné číslo<ref name=rezistence></ref>.<br />
 
==Význam==
Řádek 102 ⟶ 106:
''E. coli'' je nejběžněji používanou bakterií v metodách [[molekulární biologie]]. Její kultivace je úspěšná v médiích bohatých (kromě zdroje uhlíku, dusíku a dalších esenciálních látek tato média obsahují i aminokyseliny a vitaminy) i minimálních (obsahují pouze glukosu jako zdroj uhlíku a energie a soli jako zdroj síry, fosforu apod). Pro klonování se používají speciálně upravené kmeny ''E. coli'', které jsou zbavené schopnosti syntézy [[Restrikční endonukleáza|restrikčních endonukleáz]]. Pro účely molekulární genetiky byla připravena řada mutantů ''E. coli'':
*'''DH5'''-kmen zbavený schopnosti [[rekombinace]] tj. opravy DNA, používaný pro amplifikaci [[plazmid|plasmidové DNA]]
*'''BL21'''-kmen schopný vysoké [[exprese]]svých genů díky [[promotor]]u [[bakteriofág]]a T7, jež je integrován do chromosomu bakterie ''E. coli''.<ref> Ruml T., Rumlová M., Pačes V. Genové inženýrství, VŠCHT, 2002. ISBN 978-80-7080-499-5.</ref>.
 
 
[[Soubor:Insulin.jpg|150px|thumb|[[insulin]] (uhlík-červená, kyslík -zelená, dusík -modrá)]]
Řádek 119 ⟶ 122:
{{Sisterlinks
| commons = Category:Escherichia coli
 
}}
=== Reference ===
Řádek 148 ⟶ 150:
[[Kategorie:Enterobacteriaceae]]
[[Kategorie:Modelové organismy]]
[[Kategorie:Bakterie]]
[[Kategorie:Mikrobiologie]]
 
[[als:Escherichia coli]]