Escherichia coli: Porovnání verzí
Smazaný obsah Přidaný obsah
popis E. coli |
m význam-genové inženýrství |
||
Řádek 82:
V České republice se výskyt ''E. coli'' rezistentní k aminoglykosidům pohybuje okolo 10% případů, což je v rámci Evropy stále průměrné číslo<ref name=rezistence></ref>.<br />
==Význam==
Bakterie ''E. coli'' se vyskytuje jako součást přirozené [[mikroflóra|mikroflóry]] teplokrevných živočichů v [[tlusté střevo|tlustém střevě]] a dolní části [[tenké střevo|tenkého střev]]a. Člověk je touto bakterií kolonizován už od narození (kontaminace z potravy, přenos z již kolonizovaného jedince, nejčastěji matky). ''E. coli'' patří k nejlépe prostudovaným známým bakteriím, což je důvodem jejího využití v [[biotechnologie|biotechnologiích]] a [[genové inženýrství|genovém inženýrství]]. Mezi její klady jakožto zástupce [[Prokaryota|prokaryot]] patří rychlý růst a levná kultivační media, naopak nevýhodou použití ''E. coli'' může být její neschopnost provádět [[posttranslační modifikace]], např. [[glykosylac]]e. V takovýchto případech je v průmyslu využívána [[kvasinka]] ''[[Saccharomyces cerevisiae]]''<ref name=miami>[http://www.sciencedirect.com/science_ob=MiamiImageURL&_cid=277740&_user=640812&_pii=B9780123739445000596&_check=y&_origin=na&_coverDate=31-Dec-2009&view=c&wchp=dGLbVlB-zSkzk&md5=05688636a54fcc90df753d5da850ee9a/3-s2.0-B9780123739445000596-main.pdf Escherichia coli (anglicky)]</ref>.<br />
[[Soubor:Insulin.jpg|150px|thumb|[[insulin]] (uhlík-červená, kyslík -zelená, dusík -modrá)]]▼
'''Genové inženýrství''':<br />
''E. coli'' je nejběžněji používanou bakterií v metodách [[molekulární biologie]]. Její kultivace je úspěšná v médiích bohatých (kromě zdroje uhlíku, dusíku a dalších esenciálních látek tato média obsahují i aminokyseliny a vitaminy) i minimálních (obsahují pouze glukosu jako zdroj uhlíku a energie a soli jako zdroj síry, fosforu apod). Pro klonování se používají speciálně upravené kmeny ''E. coli'', které jsou zbavené schopnosti syntézy [[Restrikční endonukleáza|restrikčních endonukleáz]]. Pro účely molekulární genetiky byla připravena řada mutantů ''E. coli'':
*'''DH5'''-kmen zbavený schopnosti [[rekombinace]] tj. opravy DNA, používaný pro amplifikaci [[plazmid|plasmidové DNA]]
*'''BL21'''-kmen schopný vysoké [[exprese]]svých genů díky [[promotor]]u [[bakteriofág]]a T7, jež je integrován do chromosomu bakterie ''E. coli''<ref> Ruml T., Rumlová M., Pačes V. Genové inženýrství, VŠCHT, 2002. ISBN 978-80-7080-499-5.</ref>.<br /><br />
▲[[Soubor:Insulin.jpg|150px|thumb|[[insulin]] (uhlík-červená, kyslík -zelená, dusík -modrá)]]
'''Lidský insulin (Humulin®)''':<br />
'''''Diabetes mellitus I.stupně''''' je onemocnění, kdy [[slinivka břišní]] není schopna produkovat [[insulin]]. Léčba je substituční, kdy se pacientovi exogenně podává insulin. Dříve byl získáván z jatečních prasat. Docházelo však k [[alergie|alergickým reakcím]] na takto získaný insulin. Důvodem byla různá lokace glykosylace řetězců insulinu u prasat a u člověka. R. 1982 byl na trh uveden insulin získaný rekombinantně pomocí geneticky modifikované bakterie ''E. coli'' pod záštitou firmy [[Eli Lilly]]. Insulin se dále získává rekombinantními metodami i pomocí eukaryotních organismů, např. ''Saccharomyces cerevisiae'' (pod komerčním názvem Novokin® od firmy NovoNordisk)<ref>[http://www.sciencemag.org/content/215/4533/687. E. coli jako producent insulinu (anglicky)]</ref>.<br /><br />
| |||