Amesův test: Porovnání verzí

Smazaný obsah Přidaný obsah
Nová stránka: = Amesův test = Zpracováno na základě anglické verze wikipedie '''Amesův test''' slouží ke stanovení karcinogenního a mutagenního potenciálu chemických sloučenin. Ten...
 
Řádek 7:
== Metodika ==
 
V Amesově testu je použito několik kmenů bakterie Salmonella typhimurium, nesoucí mutace v genech, účastnících se syntézy aminokyseliny histidinu[[histidin]]u. Tyto mutované kmeny tedy vyžadují externí zdroj histidinu[[histidin]]u. Sleduje se schopnost testované látky způsobit reverzní mutaci a obnovit růst bakterie v mediu bez přídavku histidinu[[histidin]]u. Bakteriální kmeny jsou speciálně vytvořeny tak, aby obsahovaly jak bodové mutace, tak mutace posunující čtecí rámec. To umožňuje detekci mutagenů, působících různými mechanismy. Některé specifické sloučeniny způsobují reverzní mutaci pouze u jednoho či dvou kmenů [1]. Testované bakteriální kmeny jsou navíc mutovány v genech, zodpovědných za syntézu lipopolycharidů, což usnadňuje prostup mutagenu buněčnou stěnou [2] a také mutace v reparačním systému buňky, čímž se zvyšuje senzitivita testu [3]. Pro stimulaci metabolismu se přidává extrakt z krysích jater, jelikož některé sloučeniny samy o sobě nejsou mutagenní, ale jejich metabolity již ano [4]. Bakterie jsou kultivovány na agaru s malou dávkou histidinu[[histidin]]u, která umožňuje nastartovat růst. Po vyčerpání této iniciační dávky, přežívají pouze reverzně mutované bakterie, které jsou schopny autonomní syntézy histidinu[[histidin]]u. Mutagenní potenciál sloučeniny se stanoví na základě počtu pozorovaných kolonií po 48 hodinách.
 
== Literatura ==